番茄斑萎病毒屬非結構性NSs蛋白血清學親緣關係之研究

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Title:	番茄斑萎病毒屬非結構性NSs蛋白血清學親緣關係之研究 The study of serological relationship in the nonstructural NSs protein of the genus Tospovirus
Authors:	康雅琪
Contributors:	生物科技學系碩士班
Date:	2009
Issue Date:	2009-10-13 06:35:52 (UTC+0)
Publisher:	亞洲大學
Abstract:	薊馬傳播之番茄斑萎病毒 (tospoviruses) 屬於布尼亞病毒科 (Bunyaviridae) 之番茄斑萎病毒屬 (Tospovirus)，其病毒核鞘蛋白 (nucleocapsid protein, NP) 序列的同源性，為病毒分類為不同病毒種 (species) 之重要依據。依NP的血清學親緣關係，現行已知的19種病毒，可區分成三大血清群 (serogroups)，分別以西瓜銀斑病毒 (Watermelon silver mottle virus, WSMoV)、番茄斑點萎凋病毒 (Tomato spotted wilt virus, TSWV) 和鳶尾花黃斑病毒 (Iris yellow spot virus, IYSV) 為各血清群的代表型 (type members)。而鳳仙花壞疽斑點病毒 (Impatiens necrotic spot virus, INSV)、花生黃化扇斑病毒 (Peanut chlorotic fan-spot virus, PCFV) 及花生黃斑病毒 (Peanut yellow spot virus, PYSV) 與其他tospoviruses沒有任何的血清學關係，所以稱之為血清型 (serotypes)。在先前的研究報導中，以WSMoV之NSs蛋白做為抗原所製備的單株抗體MAb-WNSs，可測得WSMoV與IYSV二血清群的病毒。抗原決定位的分析得知，MAb-WNSs可與這些tospoviruses的NSs蛋白上之高保留性區域結合。NSs蛋白的序列分析得知，INSV與TSWV血清群病毒具有較高的同源性，而PCFV則是與PYSV最相近。本研究利用細菌表現的方式來生產INSV與PCFV的NSs蛋白，分別製備其抗血清RAs-INSs與RAs-PNSs。結果如預期地，RAs-INSs不但可與INSV反應，更可以廣泛地偵測到TSWV血清群病毒，包括TSWV、番茄黃化斑點病毒 (Tomato chlorotic spot virus, TCSV)、花生輪斑病毒 (Groundnut ringspot virus, GRSV) 和菊花莖部壞疽病毒 (Chrysanthemum stem necrosis virus, CSNV)；而RAs-PNSs則僅可測得PCFV。因本實驗室目前並無PYSV的病毒來源，故尚無法釐清PCFV與PYSV的血清關係。有鑑於此，本研究以人工合成PYSV之N基因並以細菌表現PYSV的NP來製備抗血清RAs-PYSV NP。此血清可偵測到PCFV和細菌表現的PYSV NP。綜合本研究結果，我們建議可將tospoviruses重新分類為WSMoV、TSWV、IYSV和PYSV等四大血清群，且本研究中所製備之抗血清可做為檢測tospoviruses之有利工具。
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