探討十字花科黑腐病菌中 flhA 與 flhB 基因之功能

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Title:	探討十字花科黑腐病菌中 flhA 與 flhB 基因之功能 Functionl study of flhA and flhB genes in Xanthomonas campestris pv.campestris
Authors:	劉又維
Contributors:	生物科技學系碩士班
Date:	2008
Issue Date:	2009-10-13 06:35:39 (UTC+0)
Publisher:	亞洲大學
Abstract:	Xanthomonas campestris pv. campestris ( Xcc ) 為革蘭氏陰性菌，具單極性單鞭毛，且能感染十字花科植物而導致黑腐病。根據文獻所載鞭毛細菌與第三類型分泌系統（T3SS）關係密切，T3SS 對許多病源體的致病毒素相當重要，包括 Xcc。在相似序列中，我們在 Xcc 查尋超過 40 幾個基因為鞭毛的合成相關。rpoN、fleQ、fliA、flgM、fleN、flhF 等6個基因，在我們實驗室已證明為調控許多鞭毛基因的表現。本研究中，我們報告FlhA與FlhB的功能於相似性的T3SS 蛋白InvA與SpsS 於過去報導Salmonlla中為鞭毛構造的輸出。 Xcc flhA 與 flhB 突變株經崁入突變後分析其表現型。 flhA 或 flhB 突變株具致病性，但沒有運動的能力。兩個突變株在FleQ 與 RpoN 蛋白的表現量為正常。flhA突變株在 FliA 蛋白的表現量稍有減少，但 flhB 突變株沒有。兩個突變株分別不能合成主要的鞭毛蛋白 FliC。 fliC 基因的啟動子是包含一個供選擇的 sigma 因子RNA 聚合酶轉錄與fliA基因編碼。FlgM 蛋白是一個多重 sigma 因子抑制 FliA 。成熟鞭毛的 T3SS 從細胞質釋放 FlgM 可恢復 FliA 的功能。因為 FlhA 與 FlhB 在鞭毛 T3SS 為不可缺的成分， flhA 與 flhB 突變株在 FliC 蛋白的表現量可能是由細胞質的 FlgM 蛋白堆積所抑制。第二部分的研究使用酵母菌雙雜交系統所測試 RpoN、 FleQ、 FleN、 FlhF、 FlgM、 FliA 和 NtrC 蛋白之間的交互作用，結果推測 RpoN2 和 FlhF; RpoN2和 FleQ; RpoN2 和 NtrC 之間有交互作用。
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