水稻台農67號及其香米突變體SA0420香味相關基因之探討

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Title:	水稻台農67號及其香米突變體SA0420香味相關基因之探討 Study on aroma related genes in rice（Oryza sativa L.）Tainung 67 and its aromatic mutant SA0420.
Authors:	郭淑明
Contributors:	生物科技學系碩士班
Date:	2005
Issue Date:	2009-10-13 06:35:10 (UTC+0)
Publisher:	亞洲大學
Abstract:	本研究利用光桿菌菌株對脫脂奶與明膠平板之蛋白質水解能力，自13 株供試之本土菌株中，篩選4 株活性較佳之菌株，在進一步培養於NB、LB 和PP3T 等不同的液態培養基，觀察蛋白質分解酵素之活性。初步實驗結果顯示，光桿菌菌株0805-P5G 的蛋白質分解酵素於NB 液態培養液，在培養八天後其活性較佳。光桿菌的蛋白質分解酵素經由FPLC 與High Trap DEAE sepharose FF column 及HighTrap Q sepharose XL column 等連續步驟純化，可使蛋白質分解酵素純度提高。接著利用膠體酵素活性電泳分析（zymogram）得到0805-P5G菌株的蛋白質分解酵素，其蛋白質活性位置大約為50 kDa，以聚丙烯醯胺凝膠電泳（SDS-PAGE）確認其分子量，並進行N 端與LC MS/MS定序確認其為光桿菌蛋白質分解酵素。利用FPLC 進行蛋白質純化後測得蛋白質分解酵素最適溫度為60℃、最適酸鹼值為pH 8。此蛋白質分解酵素會受金屬螯合劑EDTA 及1, 10-phenanthtoline 之抑制，證實其為金屬蛋白質分解酵素。光桿菌蛋白質分解酵素經注射大蠟蛾處理後，發現具有殺蟲效果；光桿菌蛋白質分解酵素經餵食處理後，其對本土小菜蛾有口服殺蟲效果，但對美國品系的小菜蛾口服殺蟲效果較差。
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