?用基因技術鑑定台灣珊瑚礁魚?笛鯛魚種之探討

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Title:	?用基因技術鑑定台灣珊瑚礁魚?笛鯛魚種之探討 Application of Genetic Techniques on Species Identification of Coral Reef fish Lutjanidae in Taiwan
Authors:	黃耿琳
Contributors:	生物資訊學系碩士班
Date:	2007
Issue Date:	2009-10-12 10:35:12 (UTC+0)
Publisher:	亞洲大學
Abstract:	笛鯛科魚類廣泛分佈於全世界熱帶及亞熱帶海域，屬珊瑚礁區的肉食性魚類，亦為台灣重要之經濟性魚類，產地遍佈於台灣各沿海。全世界共計有 4 亞科 22 屬 129 種，而台灣產則有 4 亞科 10 屬 51種。由於所處海域之關係，某些笛鯛科魚類會因為經由食物鏈之途徑而攝食到有毒的渦鞭毛藻 Gambierdiscus toxicus 或捕食已遭到 G.toxicus 毒化的草食性魚類，而導致人類食物中毒事件之發生。1991年6 月台灣首次記錄熱帶性珊瑚礁海魚毒之中毒事件，台北縣一家五口因食用紅鱠肝臟後，發生類似熱帶性珊瑚礁海魚毒之食物中毒症狀。近年則是在 2006 年 2 月的時候，發生三位民眾因食用購自高雄前鎮漁港魚市場的類似笛鯛科魚類而引起疑似為熱帶性珊瑚礁海魚毒之中毒案例，其中以48 歲的男性及女性這兩位病患較為嚴重，在食入類似笛鯛科魚類後產生腹痛、腹瀉、四肢無力、盜汗、皮膚癢以及肌肉劇烈疼痛等症狀，而男性病患肌肉劇烈疼痛之症狀過了一個月依舊尚未改善。經生物毒性測試分析由高雄長庚紀念醫院及台南市衛生局所提供之檢體魚片各一片後，其內臟部位抽出液之毒性分別為2.45 MU/g 和 5.36 MU/g，且小鼠會產生與熱帶性珊瑚礁海魚毒中毒之相同症狀，而注射肌肉部位抽出液之小鼠雖有熱帶性珊瑚礁海魚毒之中毒症狀出現但並未死亡。同時為瞭解上述引起食物中毒之魚類魚種，因此利用基因直接定序和聚合酶連鎖反應– 限制酶作用片段長度多型性分析技術(polymerase chain reaction – restriction fragmentlength polymorphism；PCR-RFLP)技術比較中毒檢體與其它六種台灣漁市場常見可能含有熱帶性珊瑚礁海魚毒魚類之基因體差異。本研究使用之引子為L14735/H15149，可自中毒檢體和其它已知採集六種魚種之檢體中增幅出部分cytochrome b gene 之DNA片段，其片段為475bp，經定序得知，兩個中毒案件的殘留魚片檢體之魚種同屬Lutjanu sbohar。另以限制酶Hae III 區分所有檢體，得知兩個中毒案件的殘留魚片檢體與已知L. bohar 檢體皆呈現相同切割片段，為183 bp 、151 bp 和134 bp，此切位片段圖譜顯著與其它已知魚體之PCR-RFLP 圖譜有異。故基因直接定序和PCR-RFLP 法均可順利確認產生中毒之魚片檢體之魚種為L. bohar。此外，其它從漁市場採集已知六種魚類個體並未檢出毒性。
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