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    Title: 應用奈米金粒子偵測日本腦炎病毒
    Authors: 宋羽涵
    Contributors: 亞洲大學生物科技學系碩士班
    黃素華
    Keywords: 奈米金粒子;日本腦炎病毒
    Date: 2012
    Issue Date: 2012-11-14 07:29:30 (UTC+0)
    Publisher: Asia University
    Abstract: 日本腦炎病毒(JEV)是日本腦炎的病原體,屬黃病毒科(Flavivridae)黃病毒屬。目前臨床診斷日本腦炎病毒感染的方法為即時反轉錄聚合?鏈鎖反應(Real-time RT-PCR)及IgM和IgG抗體檢驗(Capture IgM and IgG ELISA)。奈米金微粒可增加在活體上與活體外檢測的靈敏度,現在已經廣泛的使用在生物醫學以及藥物的治療發展上。本研究目的為製備日本腦炎病毒的NS1蛋白抗體,以及應用奈米金微粒偵測日本腦炎病毒的NS1蛋白。以奈米金微粒應用於免疫層析試紙(test strip)和RT-PCR實驗,偵測日本腦炎病毒,結果顯示奈米金微粒PCR反應並沒有增加產物產量,且也不能縮短聚合?連鎖反應時間,但在奈米金微粒免疫層析試紙有很好的結果。將日本腦炎病毒的NS1抗體,用在兩個不同的區域,第一區域是將日本腦炎病毒NS1抗體,固定在多孔硝酸纖維膜上的檢測區域上,第二區域是將日本腦炎病毒NS1抗體與奈米金微粒結合,形成耦合體 (conjugate)。此原理是根據毛細現象,使耦合體和抗原(或檢體) 混合後沿著硝酸纖維膜往上升,當碰到被覆有抗體固定的檢測區域時,則形成奈米金微粒-抗體-抗原-抗體之三明治型複合體。若在試紙(test strip)上形成一很小的色帶,即為正反應。日本腦炎病毒NS1蛋白的偵測極限可達10 ng/ml,這個檢測方法不僅簡便,靈敏,快速,並且可以作為日本腦病毒在急性期感染及低病毒血症的早期診斷方法。
    Appears in Collections:[生物科技學系] 博碩士論文

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